產(chǎn)品列表 / products
產(chǎn)品名稱: | 蔗糖磷酸合成酶(SPS)測試盒 |
產(chǎn)品編號: | RY6-2 |
檢測方法: | 酶標(biāo)法 |
產(chǎn)品規(guī)格: | 100管/96樣 |
運輸: | 快遞送貨上門 |
應(yīng)用范圍: | 科研用檢測試劑 |
蔗糖合成酶(Sucrose synthase,SS)試劑盒說明書
酶標(biāo)法100管/96樣
測定意義
蔗糖是源(葉片等)光合產(chǎn)物向“庫”器官運輸?shù)闹饕螒B(tài)。SS(EC 2.4.1.13)催化植物體內(nèi)游離果糖和葡萄糖合成蔗糖。
測定原理
SS催化游離果糖與葡萄糖供體UDPG反應(yīng)生成蔗糖,蔗糖與間苯二酚反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小與顏色的深淺成正比。
需自備的儀器和用品
酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、酶標(biāo)板、研缽、冰、蒸餾水
試劑的組成和配制
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體10mL×1瓶,-20℃保存;
試劑二:1mg/mL蔗糖溶液10mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體5mL×1瓶,4℃保存
試劑四:液體40mL×1瓶,4℃保存;
試劑五:液體10mL×1瓶,4℃保存;
樣品測定的準(zhǔn)備:
稱取約0.05g組織加入0.5mL提取液,冰浴中勻漿。8000g ,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
測定步驟
試劑名稱(μL) | 測定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 |
試劑一 | 75 | 75 |
樣本 | 15 |
|
試劑二 |
| 15 |
混勻,25℃準(zhǔn)確水浴10min
試劑三 | 25 | 25 |
沸水浴中煮沸10min左右(蓋緊,以防止水分散失),冷卻
試劑四 | 350 | 350 |
試劑五 | 100 | 100 |
混勻,80℃水浴保溫10min,冷卻后,取200μL至酶標(biāo)板中,480nm下測定吸光值。
SS活性計算
1、按照蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。
SS活性(U/mg prot)=A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管×1mg/mL÷蛋白濃度(mg/mL) ×100
2、按照樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。
SS活性(U/g鮮重)=A測定管吸光度÷A標(biāo)準(zhǔn)管×1mg/mL÷樣本鮮重(g/mL) ×100
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