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半胱氨酸(Cys)測(cè)試盒的操作過(guò)程
( Cysteime Kit 法)
一、測(cè)定原理
Cys 還原磷鎢酸生成鎢藍(lán),在600nm 處有吸收峰:通過(guò)600nm 吸光度,計(jì)算Cys 含量。
二、儀器設(shè)備及需自備試劑
可見(jiàn)光分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、微量移液槍、磷酸和蒸溜水
三、試劑組成:(50T/48 樣)
試劑一:液體x1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體x1 瓶,4℃保存
試劑三:粉劑x1 瓶,4℃保存。提前一天向試劑三中加5ml蒸留水充分溶解,再加磷酸1.25ml,
混勻后蓋緊(防止水分散失) 沸水浴2h; 冷卻后加20mI蒸餾水,4℃保存2周
標(biāo)準(zhǔn)品:1umol/ml 標(biāo)準(zhǔn)液x1 瓶,4℃保存。
四、操作步驟
1.半胱氨酸提?。?/span>
樣本提取詳見(jiàn)試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)。測(cè)定組織和細(xì)胞同時(shí)需要測(cè)定蛋白濃度??捎帽舅?/span>
A045-2總蛋白定量測(cè)試盒(考馬斯亮藍(lán)法)或者A045-3、A045-4總蛋白定量測(cè)試盒 (BCA
法)進(jìn)行蛋白濃度的測(cè)定。
2. 操作表
半胱氨酸(Cys)測(cè)試盒的操作過(guò)程