ELISA和生化樣本的準(zhǔn)備要求有哪些

上海信帆生物通過ELISA和生化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)，樣本的準(zhǔn)備方法如下，以下所有樣本必須盡量新鮮！

1、動(dòng)植物組織樣本（干冰運(yùn)輸）

準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量按重量（mg）：體積（μL）=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)（推薦0.9%的生理鹽水），冰水浴條件下，研磨儀（KZ-5F-3D）勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000rpm/min，離心10min，取上清液進(jìn)行測(cè)定。

2、血清樣本（干冰運(yùn)輸）

全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2h內(nèi)或4℃過夜后于4℃ 3000rpm/min離心15min，取上清即可立即檢測(cè)；或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。

3、血漿樣本（干冰運(yùn)輸）

1.生化、ELISA：可用肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于4℃ 3000rpm/min離心15min，取上清即可立即檢測(cè)；或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。

2.凝血四項(xiàng)：抽取靜脈血，按照9份靜脈血、1份抗凝劑的比例加入到3.8%（或3.2%）的枸櫞酸鈉抗凝管中，輕輕顛倒10次使之充分混勻，不得有凝塊，不得形成泡沫。

3.采樣后應(yīng)盡快分離血漿（60分鐘內(nèi)進(jìn)行），將標(biāo)本以3000rpm/min離心10-15min，使血漿分層，取上層血漿。

4.分離后的血漿-20℃以下密封可保存2周。干冰運(yùn)輸。

4、細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞：將細(xì)胞用PBS沖洗2次后，用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來，將培養(yǎng)液3000rpm/min，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

懸浮細(xì)胞：將培養(yǎng)液3000rpm/min，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞上清：標(biāo)本于4℃，3000rpm/min離心15min取上清，上清立即用于實(shí)驗(yàn)，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。

5、全血樣本（4℃運(yùn)輸）

EDTA抗凝管取適量抗凝全血。EDTA與血液最佳比例為1.5mg:1mL，樣本量不可太多或太少，取樣后上下輕輕顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻。4℃運(yùn)輸，不可與冰袋直接接觸，不可猛烈撞擊?？鼓獌H用于血常規(guī)檢測(cè)，不可運(yùn)輸后再離心取血漿。

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