CHIP實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)流程和樣本運(yùn)輸要求
信帆生物提供CHIP實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù),實(shí)驗(yàn)流程如下:
樣本處理-超聲檢測(cè)-input檢測(cè)及反饋-免疫沉淀-洗脫-產(chǎn)物檢測(cè)-結(jié)果分析
送樣運(yùn)輸要求:
只接受細(xì)胞樣本,細(xì)胞量要求為10^7以上,外地需要按照預(yù)處理步驟處理細(xì)胞,然后收集細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸;
抗體要求為CHIP級(jí)別,-20運(yùn)輸;
引物可由客戶提供,干粉常溫運(yùn)輸,液體-20運(yùn)輸;也可以提供轉(zhuǎn)錄因子和啟動(dòng)子以及樣本種屬信息,我們進(jìn)行預(yù)測(cè)并設(shè)計(jì)合成引物。
外地運(yùn)輸預(yù)處理步驟:
1、取出1平皿細(xì)胞(10cm平皿),加入190ul 37%甲醛,使甲醛的終濃度為1%(培養(yǎng)基共有7ml);
2、37攝氏度孵育孵育10min;(恒溫培養(yǎng)箱,培養(yǎng)箱要提前開啟)
3、終止交聯(lián):按350ul 2.5M甘氨酸于平皿中,混勻后,在室溫下放置5min;
4、去掉培養(yǎng)基,用預(yù)冷的PBS清洗細(xì)胞2-3次;
5、收集細(xì)胞,2000g離心5min,去上清;
6、細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸。
CHIP實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)流程和樣本運(yùn)輸要求