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文章標(biāo)題《沉默STC2對人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞肝轉(zhuǎn)移裸鼠模型的影響及作用機制研究》
摘要:目的基于Wnt/β-連環(huán)蛋白(β-catenin)信號通路探討沉默斯鈣素2(STC2)對人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞肝轉(zhuǎn)移裸鼠模型的影響及作用機制。方法將30只SPF級雄性BALB/c裸鼠隨機分為3組,即pLL3.7-shSTC2組(沉默STC2,以pLL3.7-shSTC2轉(zhuǎn)染SW480細(xì)胞構(gòu)建),pLL3.7-NC組(陰性對照,以陰性病毒載體轉(zhuǎn)染SW480細(xì)胞構(gòu)建)和pLL3.7-Con組(空白對照,僅以轉(zhuǎn)染試劑處理的SW480細(xì)胞),每組各10只。建模3周后處死裸鼠,觀察各組裸鼠肝臟標(biāo)本的轉(zhuǎn)移瘤情況,肝組織行H-E染色后在顯微鏡下觀察各組的病理改變。采用RT-PCR、免疫組織化學(xué)法及蛋白質(zhì)印跡法(Western blotting)檢測STC2、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)及Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果與pLL3.7-NC組、pLL3.7-Con組相比,pLL3.7-shSTC2組的STC2蛋白表達(dá)水平明顯降低(P<0.05)。與pLL3.7-shSTC2組相比,pLL3.7-NC組和pLL3.7-Con組裸鼠的肝臟外形不規(guī)則程度、質(zhì)地脆硬度及轉(zhuǎn)移瘤的直徑、數(shù)量
蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。
易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)稱為嗜堿性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性(neutrophilia)。
構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多,它們有不同的等電點。在普通染色法中,染色液的酸堿度為pH6左右,細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì)、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜堿性。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,pH值升高時,則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性;pH值降低時,原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝?。所以說染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng)。