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文章標(biāo)題《草果知母湯對戊四唑誘導(dǎo)癲癇大鼠海馬神經(jīng)元的保護(hù)作用及RECK/GFAP/AKT信號通路的調(diào)節(jié)作用》
摘要:目的 研究草果知母湯對戊四唑誘導(dǎo)癲癇大鼠海馬神經(jīng)元的保護(hù)作用及反轉(zhuǎn)錄富含半胱氨酸蛋白(RECK)/膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)
白激酶B(AKT)信號通路的調(diào)節(jié)作用。方法 將90只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組、癲癇模型組、草果知母湯低劑量組、草果知母湯中劑量組、草果知母湯高劑量組及陽性對照組,每組15只,大鼠采用腹腔注射戊四唑方法建立癲癇大鼠模型,造模成功后,草果知母湯低、中、高劑量組分別給予2.5 mL
、5.0 mL
、10.0 mL
的草果知母湯灌胃,陽性對照組給予丙戊酸鈉,每日1次,連續(xù)給藥4周,實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-qPCR)測定海馬組織Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA水平,尼氏染色法觀察大鼠海馬神經(jīng)元尼氏小體水平,脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記(TUNEL)染色法檢測大鼠海馬神經(jīng)元凋亡水平,免疫蛋白印跡法(Western Blot)檢測大鼠海馬組織RECK、GFAP、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、AKT水平。結(jié)果 與癲癇模型組比較,草果知母湯各劑量組大鼠海馬組織Bcl-2 mRNA水平、RECK及p-AKT水平升高,
引物合成 [1] 是通過測定引物的OD值,溶解引物,最終合成引物的一個(gè)完善的過程。
目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺三酯法。亞磷酰胺三酯法合成DNA片段,具有高效、快速的偶聯(lián)以及起始反應(yīng)物比較穩(wěn)定的特點(diǎn)。亞磷酰胺三酯法是將DNA固定在固相載體上完成DNA鏈的合成的,合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的,相鄰的核苷酸通過3′→5′磷酸二酯鍵連接。引物合成特點(diǎn)
1.引物合成的純度高。
2.合成的序列長。
3.合成的效果好。