GUS染色試劑盒可配置多少染色液

GUS染色試劑盒 (GUS Staining Kit) 采用經(jīng)典的組織化學方法，通過與底物的顏色反應來對植物中gus基因融合標記進行快速檢測。

gus基因存在于大腸桿菌E.coli等一些細菌基因組內(nèi)，其表達產(chǎn)物β-葡萄糖苷酸酶 (GUS，β-glucuronidase，β-D-葡萄糖苷酸酶)是一種水解酶，能催化許多β-葡萄糖苷酯類物質(zhì)的水解。因為絕大多數(shù)植物細胞內(nèi)不存在β-葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此gus基因是轉(zhuǎn)基因植物常用的報告基因之一，尤其是在研究外源基因瞬時表達的轉(zhuǎn)化實驗中被廣泛應用。

β-葡萄糖苷酸酶可以將5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（X-Gluc）分解為藍色的不溶物質(zhì)，因此用含有X-Gluc底物的染色液浸泡轉(zhuǎn)gus基因植物，具有GUS活性的部位或位點呈現(xiàn)藍色或藍色斑點，可用肉眼或顯微鏡觀察到。其檢測方法簡單、快速、靈敏、穩(wěn)定，且背景活性低。

本試劑盒包含GUS染色的全部試劑，使用方便，只需將配制好的X-Gluc溶液和染色緩沖液按照比例混合即配成GUS染色液。該試劑盒可以配制50ml的GUS染色液。

保存條件：

1.X-Gluc -20℃避光保存，X-Gluc溶解液室溫保存，GUS染色緩沖液4℃保存。未配制的試劑盒按照溫度貯存，有效期2年。

2.配制好的X-Gluc溶液(50×) -20℃避光保存30天，長期-80℃保存。

注意事項：

1.GUS染色工作液好現(xiàn)用現(xiàn)配，短期貯存可以-20℃保存2-3天。

2.X-Gluc溶液(50×) 應避免反復凍融，否則染色效率會下降，因此建議按照單次使用量分裝貯存。

3.由于植物組織特異性等原因，藍色顏色反應可能不*相同，請根據(jù)實際情況摸索具體的實驗條件，調(diào)整樣品制備方法和染色時間。對于擬南芥的根、花、葉片，以及煙草幼苗的根就可以不做任何預處理而直接染色。但是對于煙草和馬鈴薯的莖和葉就必須先剪切成薄片（約1-3mm）再進行染色。當操作更大的組織樣品時，可以選用真空滲透法來促進染色工作液滲入細胞。

4.為了您的安全和健康，操作時請穿著實驗服并佩戴一次性手套。