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植物血球凝集素生物活性
植物血凝素(Phytohaemagglutinin, PHA)是一種發(fā)現(xiàn)于植物特別是豆科植物中的凝集素(lectin),屬于高分子糖蛋白類,是低聚糖(由半乳糖,N-乙酰葡糖胺和甘露糖所構(gòu)成)和蛋白質(zhì)的復(fù)合物,具有促進(jìn)有絲分裂和誘導(dǎo)干擾素分泌的活性。PHA 由兩個分子種類構(gòu)成,一種是紅細(xì)胞凝集素 (PHA-E),具有低促有絲分裂活性和高紅細(xì)胞凝集活性,另一種是白細(xì)胞凝集素 (PHA-L),具有高促有絲分裂和白細(xì)胞凝集活性,但紅細(xì)胞凝集活性極低。 PHA-E 不具有血型特異性,但凝集作用受某些寡糖抑制。PHA-P 是在分離和純化紅細(xì)胞凝集素和白細(xì)胞凝集素前 PHA 的蛋白質(zhì)形式。PHA-M 為粘蛋白形式。由相應(yīng)的已純化凝集素制備偶聯(lián)物。
目前市場上的PHA,常以PHA-L,PHA-E,PHA-M和PHA-P等形式提供。PHA-L是純化的L4,主要功能就是作為T淋巴細(xì)胞的刺激原,廣泛用于免疫學(xué)研究(如作為INF-γ ICS、ELISPOT實驗的陽性對照;或作為PBMC培養(yǎng)的刺激物),也可以作為順行神經(jīng)示蹤劑;PHA-E則是純化的E4,主要的用途是紅細(xì)胞凝集或者糖基化修飾的研究。PHA-P是在分離和純化PHA-L和PHA-E前PHA的蛋白質(zhì)形式,PHA-M是植物血凝素的粘性蛋白形式,兩者成分相當(dāng),主要用于刺激外周單個核細(xì)胞增殖,促進(jìn)某些細(xì)胞因子的產(chǎn)生和膜表面蛋白的表達(dá)。
溶解和使用濃度:直接用無菌PBS或細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行配制,并使用0.2 µm濾膜過濾。建議存儲濃度為2-10 mg/ml,用來刺激淋巴增殖的推薦工作濃度2-10 µg/ml。
PHA是一種促細(xì)胞分裂原(mitogen)。在體外能刺激小淋細(xì)胞轉(zhuǎn)化成具有免疫活性的淋細(xì)胞,并促進(jìn)其分裂。轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞能分泌各種淋巴因子。
1、PHA對外周周血淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用。外周血淋巴細(xì)胞與PHA在體外一起培養(yǎng),可使小淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞。
2、PHA刺激淋巴細(xì)胞有絲分裂。
3、PHA能增強(qiáng)淋巴細(xì)胞玫瑰花環(huán)率,可用以判斷機(jī)體細(xì)胞免疫功能。
4、PHA有促進(jìn)腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬作用。
5、PHA能誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞移動抑制因子。
6、PHA能用于淋巴細(xì)胞亞太群研究。