β-木糖苷酶測定試劑盒說明書

產品內容：
提取液：液體50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體2mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體35mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體35mL×1 瓶，4℃保存。
標準液：液體1ml×1支，4℃保存，10?mol/ml對硝基苯酚溶液。

產品說明：

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細菌和真菌等生物體，是催化木聚糖類半纖維素降解的關
鍵酶，產物木糖可作為碳源應用于微生物發(fā)酵。另外，β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應用于造
紙工業(yè)，比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保，具有廣泛的應用價值。
β-木糖苷酶催化對硝基苯酚-β-D-木糖苷產生對硝基苯酚，對硝基苯酚在405nm 處有特征吸收峰，
測定405nm 光吸收增加速率，可計算β-木糖苷酶活性。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿和蒸餾水。

一、粗酶液提取
1. 植物樣本：稱取約0.1g 樣品，加1.0 mL 提取液充分冰浴勻漿，然后12000rpm，4℃，離心20min，
棄沉淀，取20μL 上清測定蛋白含量，剩余上清作為待測酶液。
2. 細菌、真菌樣本：收集約500 萬個細胞，加入1.0 mL 提取液，超聲波破碎（冰浴，功率300w，
超聲3 秒，間隔7 秒，總時間3min）；然后10000rpm，4℃，離心10min，棄沉淀，取20μL 上
清測定蛋白含量，剩余上清置于冰上待測。
3. 標準液的處理：用試劑二將標準液稀釋至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0 ?mol/ml。

注意事項：
1、吸光度變化應該控制在0.05-0.6 之間。否則加大樣品量或稀釋樣品，注意計算公式中參與計算
的稀釋倍數(shù)要相應改變。
2、樣品蛋白質含量需要另外測定，可選用考馬斯亮藍法蛋白含量測定試劑盒進行測定。