海藻糖含量檢測試劑盒說明書

規(guī)格:100T/96S

產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體100ml×1 瓶，4℃保存；
試劑一：粉劑×1 瓶，4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 支，含10mg 海藻糖。

產(chǎn)品簡介：
海藻糖存在于大量有機(jī)體中，包括細(xì)菌、藻類、酵母、植物、昆蟲和其他無脊椎動(dòng)物。由于海
藻糖具有*的不同于其他碳水化合物的生物學(xué)特性，能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及
毒性物質(zhì)等惡劣環(huán)境下保護(hù)生物體細(xì)胞蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、核酸等組分不受損害。
測定方法采用蒽酮比色法。具有簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優(yōu)點(diǎn)。但是蒽酮比色法也
存在一定缺陷，如果樣本中含有可溶性糖，則會(huì)影響測定。本試劑盒建議用于除海藻糖外不含其他
可溶性糖樣本的測定。

操作步驟：

一、海藻糖提取：

1、細(xì)菌或細(xì)胞處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入
1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％或200w，超聲3 秒，間隔10 秒，重復(fù)30 次），
室溫靜置45min，振蕩3~5 次，冷卻后，8000g，常溫離心10min，取上清。

2、組織的處理：稱取約0.1g 樣本，加入1mL 提取液，冰浴勻漿或研碎，室溫靜置45min，振蕩3~5
次，冷卻后，8000g，常溫離心10min，取上清。

3、血清（漿）的處理：吸取約100μL 血清（漿），加入1mL 提取液，充分混勻，室溫靜置45min，
振蕩3~5 次，冷卻后，8000g，常溫離心，取上清。

4、標(biāo)準(zhǔn)品的處理：標(biāo)準(zhǔn)品用1ml 雙蒸水溶解，溶液濃度為10mg/ml，稀釋到0.1、0.08、0.06、0.04、
0.02、0mg/ml。

二、測定操作表：

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，波長調(diào)節(jié)至620nm，蒸餾水調(diào)零。調(diào)節(jié)水浴鍋至95℃。

2、工作液的配制：臨用前在每瓶試劑一中加入7mL 蒸餾水后，緩慢加入28mL 濃硫酸，不斷攪拌，
充分溶解，待用。用不完的試劑4℃保存一周。

3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：取60?l 標(biāo)準(zhǔn)液和240?l 現(xiàn)配的工作液混勻，95℃水浴10 min，（蓋緊，防止
水分散失）自然冷卻至室溫，取200?l 至比色皿或酶標(biāo)板中，在620nm 處測吸光值A(chǔ)。根據(jù)標(biāo)
準(zhǔn)樣本的濃度（y）和吸光度（x）建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4、樣本測定：取60?l 樣本和240?l 現(xiàn)配的工作液混勻，95℃水浴10 min，（蓋緊，防止水分散失）
自然冷卻至室溫，取200?l 至比色皿或酶標(biāo)板中，在620 nm 波長下測定吸光度值為A。
若吸光值大于1，請將樣本用提取液適當(dāng)稀釋。zui后計(jì)算時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。