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三碘甲腺原氨酸(T3)放免試劑盒說明書

發(fā)布時間:2018/3/15 點擊量:1534

三碘甲腺原氨酸(T3)放免試劑盒說明書

產(chǎn)品用途:

三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4),二者均為酪氨酸的碘化物,由甲狀腺分泌。
其中 T4在外周脫碘后,約 2/5 轉(zhuǎn)化為 T3(T3),3/5 轉(zhuǎn)化為反 T3(r T3),這一過程
是在肝內(nèi)完成的。肝細胞的微粒體和胞漿膜內(nèi)存在碘化甲狀腺素脫碘酶,其中 5ˊ-
脫碘酶催化 T4分解為高能的 T3, 5-脫碘酶催化 T4分解為無活性的 rT3。在肝細胞內(nèi),
甲狀腺激素分布于細胞核、線粒體、微粒體和可溶性成分中,在這些部分中其含量水
平的高低變化依次為:可溶性成分﹥微粒體﹥線粒體﹥細胞核,且 T4﹥T3。肝臟是甲
狀腺素代謝、滅活的主要場所,也是甲狀腺素結(jié)合蛋白的合成部位,該結(jié)合蛋白可與
血清蛋白競爭性攝取甲狀腺素,是肝臟攝取甲狀腺素的主要因素。血清中,甲狀腺素
絕大部分與蛋白質(zhì)結(jié)合,僅極少部分呈游離型,游離型甲狀腺素的多少與肝臟對甲狀
腺素的攝取量成正比。肝硬化時,甲狀腺素的代謝將必然受到影響。定量測定總 T3
含量,對評價甲狀腺功能狀態(tài)具有重要意義。

實驗原理:

本品采用了第二抗體+聚乙二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理:含 T3的樣品和 125I 標記
的 T3 與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及 PEG,使免疫復(fù)合物
沉淀,離心,測沉淀物放射性強度。通過標準曲線得到樣本中 T3的濃度。

實驗方法:

1、將實驗所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進行操作;
2、取 60X12mm 聚苯乙烯管進行編號,所有實驗均做雙管重復(fù);
3、取每個濃度的標準品、質(zhì)控血清和樣本 50µl 加入相應(yīng)編號的試管中;
4、每管均各加入 200µl 標記物工作液;
5、除去 T、NSB 管以外的各管均各加入 200µl 抗體工作液,充分混勻;
6、37℃溫育 1.0 小時;
7、每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻;
8、室溫放置 10~15 分鐘后,離心 3500 轉(zhuǎn)/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液;
9、用 γ-計數(shù)器測定各管放射性計數(shù)(CPM)。 推薦檢測時間: 1 分鐘
10、從標準曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度

三碘甲腺原氨酸(T3)放免試劑盒說明書

 


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