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改良 HE(蘇木素-伊紅)染色試劑盒說明書

發(fā)布時(shí)間:2021/6/2 點(diǎn)擊量:1113
改良 HE(蘇木素-伊紅)染色試劑盒
規(guī)格4×10ml/4×100ml
產(chǎn)品內(nèi)容         1121-10         1121-100
蘇木素染液           10ml             100ml
分化液               10ml             100ml
返藍(lán)液               10ml             100ml
伊紅染液              10ml            100ml
注意:環(huán)境溫度低時(shí),返藍(lán)液可能會有結(jié)晶析出,將分化液 37℃水浴融化 10min 后,吸取上清即可。
產(chǎn)品說明
蘇木精-伊紅染色法 ( Hematoxylin-Eosin staining ),簡稱 HE 染色法,是病理學(xué)常規(guī)制片中基
本的染色方法。蘇木精染液為堿性染料,主要使嗜堿性物質(zhì)如細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體
著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使嗜酸性的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。
染色過程需要根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)樣本進(jìn)行優(yōu)化,著色情況的不同與組織或細(xì)胞的種類不同有關(guān),也
隨其生活周期及病理變化而改變。例如,很多細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)
其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),伊紅著色由淺變
深。本產(chǎn)品所包含試劑均為工作液,可直接使用。新型試劑盒相比常規(guī)的,伊紅和蘇木素著色時(shí)間
更短,顏色對比更鮮亮。
操作說明(以下步驟僅供參考):
(一)石蠟組織切片染色
1、取材組織塊,經(jīng)固定后,常規(guī)石蠟包埋,切片。
2、石蠟切片脫蠟水化:
1
二甲苯(Ⅰ)脫蠟 10 min。
2
二甲苯(Ⅱ)脫蠟 10 min。
3
無水乙醇(Ⅰ) 2 min。
4
無水乙醇(Ⅱ) 2 min。
5
95%乙醇 2 min。
6
80%乙醇 2 min。
7
70%乙醇 2 min。
8
蒸餾水 2 min。
3、蘇木素染液染色 3-10min(具體時(shí)間根據(jù)染色結(jié)果和實(shí)驗(yàn)要求調(diào)整),自來水沖洗 5-10s。
4、分化液分化 1-5s,自來水沖洗 20-30s,洗掉分化液即可。
5、返藍(lán)液返藍(lán) 10s-1min,自來水沖洗 20-30s,洗掉返藍(lán)液即可。
6、伊紅染色 30s-2min(具體時(shí)間根據(jù)染色結(jié)果和實(shí)驗(yàn)要求調(diào)整),自來水沖洗 1-5s。
7、脫水、透明、封片。
①80%乙醇(Ⅰ) 2-3s
產(chǎn)品內(nèi)容
1121-10
1121-100
蘇木素染液 10ml 100ml
分化液 10ml 100ml
返藍(lán)液 10ml 100ml
伊紅染液 10ml 100ml2頁,共 2
②90%乙醇(Ⅱ) 2-3s
③95%乙醇(Ⅰ) 2-3s
④95%乙醇(Ⅱ) 2-3s
⑤無水乙醇(Ⅰ) 2-3s
⑥無水乙醇(Ⅱ) 1min
⑦二甲苯(Ⅰ) 1min
⑧二甲苯(Ⅱ) 1min
⑨中性樹膠封固,鏡下觀察。
(二)冰凍切片或細(xì)胞染色
1. 冰凍切片恢復(fù)室溫后直接固定 3-5min,水洗 3-5min。
2. 蘇木素染色 1-2min。
3. 分化液分化 10s,水洗 1-2min。
4. 返藍(lán)液反藍(lán) 2-5min,水洗 1-2min。
5. 伊紅染色 30s-2min,自來水稍洗。
6. 脫水,透明,封片:
1
95%乙醇(Ⅰ) 2-3s。
2
95%乙醇(Ⅱ) 2-3s。
3
100%乙醇(Ⅰ)2-3s。
4
100%乙醇(Ⅱ)1min。
5
二甲苯(Ⅰ) 1min。
6
二甲苯(Ⅱ) 1min。
7
中性樹膠封固,鏡下觀察。
染色結(jié)果:
細(xì)胞核呈藍(lán)色;細(xì)胞質(zhì)、纖維呈紅色。
注意事項(xiàng):
1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。
2. 系列乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液。
3. 第一次使用本試劑盒時(shí)建議先取 1-2 個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
4. 染色過程推薦淺染,通常只需能夠分辨細(xì)胞核即可,顏色過深有可能影響細(xì)胞質(zhì)顏色。
5. 分化液的分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和鹽酸乙醇分化液的新舊而定,另外分化后
自來水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠,以便*清洗酸。
6. 冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。
7. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
 

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