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上海信帆生物代理銷(xiāo)售：土壤硝酸還原酶試劑盒，現(xiàn)貨供應(yīng)，7折*，歡迎！
土壤硝酸還原酶（Solid-Nitrate Reductase，S-NR）試劑盒說(shuō)明書(shū)
測(cè)定意義
S-NR催化土壤中硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，是土壤硝態(tài)氮還原的關(guān)鍵酶。研究S-NR的活性對(duì)合理施肥，降低氮素的損失具有重要意義。
測(cè)定原理
S-NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋ +H 2 O；產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下，與對(duì)–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成紅色偶氮化合物；生成的紅色偶氮化合物在 540 nm 有zui大吸收峰，可用分光光度法測(cè)定。
土壤硝酸還原酶試劑盒
需自備的儀器和用品
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
試劑一：液體20mL×1瓶，-20℃保存。
試劑二：液體10mL×1瓶，-20℃保存。
試劑三：液體25mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體25mL×1瓶，4℃保存。
試劑五：標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液1mL，-20℃保存。
0.1mmol/L的NaNO2標(biāo)準(zhǔn)液的配制：用時(shí)將試劑五稀釋100倍，即取 0.1ml 加蒸餾水定容至 10ml。
測(cè)定操作表
試劑名稱(chēng) | 1mL帶蓋離心管 | |||
測(cè)定管 | 對(duì)照管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 | |
風(fēng)干土樣（g） | 0.1 | 0.1 |
|
|
0.1mmol/LNaNO2（μL） |
|
| 100 |
|
雙蒸水（μL） |
| 500 |
| 100 |
試劑一（μL） | 375 |
| 375 | 375 |
試劑二（μL） | 125 |
| 125 | 125 |
混勻后，蓋蓋后37℃水浴60min，8000g室溫離心10min，取上清液
上清液（μL） | 400 | 400 | 400 | 400 |
試劑三（μL） | 250 | 250 | 250 | 250 |
試劑四（μL） | 250 | 250 | 250 | 250 |
混勻，顯色20min后，4000g，室溫離心10min，用蒸餾水調(diào)零，540nm下讀取各管吸光值
注意事項(xiàng)
1、試劑一、試劑二和試劑五在冰上放置，用完立即放回-20℃。
2、標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測(cè)一次。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
S-NR活性計(jì)算：
單位的定義：24h每g土樣中產(chǎn)生1μmol NO2ˉ的量為一個(gè) S-NR活力單位。
S-NR（U/g）=標(biāo)準(zhǔn)品濃度（0.1mmol/L）×（A測(cè)定管-A對(duì)照管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷反應(yīng)時(shí)間（1/24h）×反應(yīng)總體積（0.5mL）÷樣本質(zhì)量（0.1g）=12×（A測(cè)定管-A對(duì)照管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）
土壤硝酸還原酶試劑盒
