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兔抗傷寒桿菌O血清實驗方法
別名:兔抗傷寒桿菌O(或H)血清;兔抗傷寒桿菌O(或H)免疫血清(抗血清)
本品是由傷寒桿菌O (或H)抗原免疫家兔獲得的抗傷寒桿菌O(或H)血清抗體,與傷寒桿菌O (或H)抗原37℃水浴箱18小時測得效價。
試驗方法:
1.取清潔小試管8支,依次編號。
2.于小試管內(nèi)各注入0. 5ml生理鹽水。
3.于第一管內(nèi)加入1: 10 稀釋的抗O (或H)血清0.5ml,用1ml吸管吹吸三次,混勻,吸出0.5ml注入第二管作對倍稀釋,...依次稀釋至第7管,棄去0.5ml,第8管為對照。
4.各管內(nèi)注入傷寒桿菌O (或H)菌液0.5ml;
5.加完菌液后,振蕩試管架,混勻,放置37°C水浴箱18小時后觀察結(jié)果。
快速檢測法:(H抗原抗體反應(yīng))置于50℃水浴箱2-4小時結(jié)果,但其效價要比過夜觀察低1-2個滴度。
[結(jié)果與分析]
先觀察對照管,正確結(jié)果應(yīng)無凝集現(xiàn)象,再觀察各試驗管的凝集現(xiàn)象,
凝集程度以“+"多少表示之。
(++++ )最強(qiáng),上液澄清,細(xì)菌全部凝集沉淀于管底。
(+++)強(qiáng),上液輕度混濁, 細(xì)菌大部分凝集沉淀于管底。.
(+)弱,上液混濁,細(xì)菌少部分凝集。
(-)不凝,液體呈乳狀與對照管相同。
效價判定: 以能出現(xiàn)"+"凝集現(xiàn)象的血清最高稀釋度為該血清的凝集效價。即第 1~7孔的血清最終稀釋度分別為1:40,1:80, 1:160, 1:320,1:640,1:1280, 1:2560。
【注意事項】
1) 所有的生物試劑或者化學(xué)試劑理應(yīng)被認(rèn)為具有潛在危害,應(yīng)妥善保管于合適的實驗室內(nèi),嚴(yán)禁存放于住宅、宿舍等生活場所。嚴(yán)禁非專業(yè)人員或兒童接觸,以免造成不必要的傷害。
2) 推薦只有經(jīng)過良好實驗室培訓(xùn)的專業(yè)人員方可進(jìn)行操作。操作時請佩戴合適的實驗防護(hù)設(shè)施,例如實驗服、實驗口罩、一次性實驗手套、防護(hù)面罩等。不要用身體任何部位或者皮膚與之直接接觸。嚴(yán)禁吞食。
3) 在操作時,嚴(yán)禁用嘴吹吸;移液和振蕩時,小心謹(jǐn)慎,避免液體飛濺。
4)使用完成后,不得隨意丟棄。請按照實驗室廢棄化學(xué)品處理規(guī)定,進(jìn)行妥善處理。