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產(chǎn)品上新-人永生化表皮細胞
培養(yǎng)基 DMEM-H完全培養(yǎng)基:90%DMEM-H+10%FBS
傳代方法 復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%-90%時,重復(fù)傳代操作或者凍存。
生長條件 37℃;5%CO2+95%空氣;
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
安全等級 1
形態(tài) 上皮細胞樣,多角形
細胞膜 細胞壁的內(nèi)側(cè)緊貼著一層極薄的膜,叫做細胞膜(Cell Membrane)。這層由蛋白質(zhì)分子和磷脂雙分子層組成的薄膜,水和氧氣等小分子物質(zhì)能夠自由通過,而某些離子和大分子物質(zhì)則不能自由通過。因此,它除了起著保護細胞內(nèi)部的作用以外,還具有控制物質(zhì)進出細胞的作用:既不讓有用物質(zhì)任意地滲出細胞,也不讓有害物質(zhì)輕易地進入細胞。此外,它能進行細胞間的信息交流。 細胞膜在光學(xué)顯微鏡下不易分辨。用電子顯微鏡觀察,可以知道細胞膜主要由蛋白質(zhì)分子和脂類分子構(gòu)成。在細胞膜的中間,是磷脂雙分子層,這是細胞膜的基本骨架。在磷脂雙分子層的外側(cè)和內(nèi)側(cè),有許多球形的蛋白質(zhì)分子,它們以不同深度鑲嵌在磷脂分子層中,或者覆蓋在磷脂分子層的表面。這些磷脂分子和蛋白質(zhì)分子大都是可以流動的,可以說,細胞膜具有一定的流動性。細胞膜的這種結(jié)構(gòu)特點,對于它完成各種生理功能是非常重要的。
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