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紫外分光光度計(jì)的波長(zhǎng)范圍:
(1)200~400nm的紫外光區(qū),(2)400~760nm的可見光區(qū), (3)2.5~25μm(按波數(shù)計(jì)為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區(qū)。
紫外分光光度計(jì)的檢測(cè)原理:
當(dāng)一束強(qiáng)度為I0的單色光垂直照射某物質(zhì)的溶液后,由于一部分光被體系吸收,因此透射光的強(qiáng)度降至I,則溶液的透光率T為:
根據(jù)朗伯(Lambert)-比爾(Beer)定律:
A=abc
式中A為吸光度,b為溶液層厚度(cm),c為溶液的濃度(g/dm^3), a為吸光系數(shù)。其中吸光系數(shù) 與溶液的本性、溫度以及波長(zhǎng)等因素有關(guān)。溶液中其他組分(如溶劑等)對(duì)光的吸收可用空白液扣除。
由上式可知,當(dāng)溶液層厚度b和吸光系數(shù)a固定時(shí),吸光度A與溶液的濃度成線性關(guān)系。在定量分析時(shí),首先需要測(cè)定溶液對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸收情況(吸收光譜),從中確定zui大吸收波長(zhǎng) ,然后以此波長(zhǎng) 的光為光源,測(cè)定一系列已知濃度c溶液的吸光度A,作出A~c工作曲線。在分析未知溶液時(shí),根據(jù)測(cè)量的吸光度A,查工作曲線即可確定出相應(yīng)的濃度。這便是分光光度法測(cè)量濃度的基本原理。
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